Αντίστροφες εξαρτήσεις RT ΕΎΚΟΛΟ ΙΙ μεταγραφής αντιδραστηρίων εργαστηρίων για την παραγωγή των πρώτων υλικών STRAND CDNA και του αντιδραστηρίου εργαστηρίων εξοπλισμού

Γρήγορα και ιδιαίτερα ευαίσθητες εργαστηρίων εξαρτήσεις RT ΕΎΚΟΛΟ ΙΙ μεταγραφής αντιδραστηρίων αντίστροφες για την παραγωγή του πρώτος-σκέλους cDNA

Εφαρμογή εξαρτήσεων

Άμεσα χρησιμοποιημένος για πραγματικό - χρονικό PCR ποσοτική ανάλυση της έκφρασης γονιδίων.

Μπορέστε γρήγορα και ακριβώς να αναλύσετε τα ποσά ιχνών RNA όπως οι ιοί RNA.

Αντίστροφη μεταγραφή των προτύπων RNA με την υψηλή ικανοποιημένη ή σύνθετη δευτεροβάθμια δομή ΑΕΡΙΑΣ ΧΡΩΜΑΤΟΓΡΑΦΊΑΣ.

Πληροφορίες τμημάτων εξαρτήσεων

Μίγμα ή-EasyTM 2×RT: Foregene αντίστροφο Transcriptase, RNase ανασταλτικός παράγοντας, dNTPs, σταθεροποιητής, ανυψωτής, Optimizer και αντίστροφος εγχυτήρας μεταγραφής (τυχαίος εγχυτήρας, οληγο (DT) εγχυτήρας ₁₈) με τη βελτιστοποιημένη αναλογία.

RT ανοχή μιγμάτων

Το μίγμα ή-EasyTM 2×RT παρουσίασε πολύ υψηλή ανοχή στα άλατα οινοπνεύματος και guanidine μετά από να εξετάσει την ανάλυση. Το RNA που καθαρίζεται στο εργαστήριο έχει συχνά τα υπολείμματα αλάτων οινοπνεύματος και guanidine, τα οποία έχουν μια ισχυρή ανασταλτική επίδραση στην αντίστροφη μεταγραφή, με συνέπεια την ανεπαρκή αντίστροφη επίδραση μεταγραφής ή τη χαμηλή αντίστροφη αποδοτικότητα μεταγραφής. Η ανοχή των εύκολων προϊόντων σειράς Foregene RT στα άλατα οινοπνεύματος και guanidine καθιστά την αντίστροφη μεταγραφή ευκολότερη και αποδοτικότερη.

Ανάλυση της ανοχής οινοπνεύματος

Ανάλυση guanidine της αλατισμένης ανοχής

Προετοιμασία πριν από τη λειτουργία

Έντονα συνιστάται οι χρήστες να διαβάζουν τις οδηγίες προσεκτικά πρίν χρησιμοποιούν αυτήν την εξάρτηση. RT οι εύκολες εξαρτήσεις σειράς είναι εύκολο να λειτουργηθούν, κατάλληλο και γρήγορο, και οι οδηγίες παρέχουν τη σωστή χρήση της ολόκληρης εξάρτησης. Παρακαλώ προετοιμάστε τα απαραίτητους πειραματικούς υλικά και τον εξοπλισμό πριν τη χρήση.

Ποσό RNA προτύπων

Το RNA προτύπων πρέπει κατά προτίμηση να εξαχθεί από τα φρέσκα δείγματα ή να αποθηκευτεί σε -80°C (το επαναλαμβανόμενα πάγωμα και το ξεπαγώνω του RNA πρέπει να αποφευχθούν).

RT EasyTM ΙΙ: (συνολικό RNA ή 0.01pg-0.05μg mRNA 0.1pg-0.5μg)/σύστημα 10μl.

Μη συγκεκριμένη ενίσχυση

1. Αδικαιολόγητο σχέδιο εγχυτήρων.

Σύσταση: Εγχυτήρες σχεδίου σύμφωνα με τις αρχές σχεδίου εγχυτήρων.

2. Υπολείμματα Genomic.

Συστάσεις: Χρησιμοποιήστε μια αντίστροφη εξάρτηση μεταγραφής όπως (γάτα. Αριθ. 01031-01031) αυτός περιέχει τους εγχυτήρες δια-intron αφαήρεσης ή σχεδίου γονιδιώματος.

Rt-QPCR κανένα σήμα ενίσχυσης

1. Το RNA υποβιβάζεται.

Σύσταση: Το υλικό για την εξαγωγή RNA πρέπει να είναι όσο το δυνατόν φρεσκότερο, και το υψηλής ποιότητας και high-purity RNA πρέπει να χρησιμοποιηθεί.

2. Το RNA περιέχει τους ανασταλτικούς παράγοντες.

Σύσταση: Οι αντίστροφοι ανασταλτικοί παράγοντες μεταγραφής περιλαμβάνουν γενικά SDS, guanidine τα άλατα, EDTA, κ.λπ. Συστήνεται να πλυθεί το ίζημα RNA με την αιθανόλη 70% για να αφαιρέσει τους ανασταλτικούς παράγοντες.

3. Ζητήματα σχεδίου εγχυτήρων.

Σύσταση: Σύμφωνα με την αρχή σχεδίου εγχυτήρων, ξανασχεδιάστε τους εγχυτήρες για την επιθεώρηση.

Η ζώνη στόχων εμφανίζεται στον κενό έλεγχο

1. Μόλυνση των λειτουργούντων εργαλείων ή των αντιδραστηρίων.

Σύσταση: Όλος τα αντιδραστήρια ή ο εξοπλισμός για το πείραμα πρέπει να αποστειρωθούν. Να είστε προσεκτικός και ευγενής για να αποτρέψει τα δείγματα DNA από το σχεδιασμό στο σιφώνιο ή ανατροπή από το σωλήνα φυγοκεντρωτών.

2. Η μόλυνση εμφανίστηκε κατά τη διάρκεια PCR της προετοιμασίας συστημάτων αντίδρασης.

Σύσταση: Πάρτε τις απαραίτητες προφυλάξεις κατά το χειρισμό, π.χ.: Φορέστε τα γάντια λατέξ, άκρες φίλτρων χρήσης. Χρήση πραγματική - χρονικό PCR μίγμα σε ένα σύστημα μόλυνση-απόδειξης.

3. Οι εγχυτήρες υποβιβάζονται.

Σύσταση: Η ηλεκτροφόρηση sds-ΣΕΛΙΔΩΝ χρήσης για να ανιχνεύσει εάν οι εγχυτήρες υποβιβάζονται, και αντικαθιστά με τους νέους εγχυτήρες για τα πειράματα ανίχνευσης φθορισμού.