Lnc-RT HeroTM Ι (με το gDNase) έξοχη πρόμιξη για τη σύνθεση πρώτος-σκελών cDNA από το lncRNA Cat.No.RTL-09098/09099

Lnc-RT HeroTM Ι (με το gDNase)

Έξοχη πρόμιξη για τη σύνθεση πρώτος-σκελών cDNA από το lncRNA

Cat.No.RTL-09098/09099

Περιγραφή:

Το lnc-RT HeroTM Ι (με το gDNase) είναι ένα αντίστροφο σύστημα μεταγραφής που αναπτύσσεται ειδικά για το lncRNA για να αφαιρέσει γρήγορα τη genomic μόλυνση DNA. 5×gDNase το μίγμα μπορεί γρήγορα να αφαιρέσει το υπόλοιπο γονιδίωμα στο RNA σε 42°C για 2 λεπτά, αποφεύγοντας αποτελεσματικά την παρέμβαση του γονιδιώματος στα αποτελέσματα qPCR.

Το μίγμα 5×l-rt HeroTM περιέχει Foregene LncRNA αντίστροφο Transcriptase που αναπτύσσεται ειδικά από Foregene, το οποίο είναι ένας νέος τύπος του αντίστροφου transcriptase συγκεκριμένα για το lncRNA και άλλα μακροχρόνια σύνθετα πρότυπα RNA, με την ισχυρότερη συγγένεια RNA και την υψηλότερη αποδοτικότητα καταγραφής αντιστροφής. Το βελτιστοποιημένο σύστημα καθιστά το αντίστροφο ποσοστό μεταγραφής γρηγορότερο και μπορεί εύκολα να μεταγράψει τα πρότυπα RNA με την υψηλή ικανοποιημένη και σύνθετη δευτεροβάθμια δομή ΑΕΡΙΑΣ ΧΡΩΜΑΤΟΓΡΑΦΊΑΣ. Η πρώτη σύνθεση σκελών cDNA μπορεί να ολοκληρωθεί σε 42°C σε 15 λεπτά.

Προδιαγραφές:

25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns

Τμήματα εξαρτήσεων

Πληροφορίες τμημάτων εξαρτήσεων

-5×gDNase μίγμα: gDNA απομακρύνοντας τον πράκτορα, είναι απαραίτητο να χρησιμοποιηθεί το αντιδραστήριο σύμφωνα με τις οδηγίες λειτουργίας προτού να εκτελεσθεί η RT αντίδραση (η εσωτερική περιεκτικότητα σε γλυκερίνη δεν μπορεί να παγώσει, και δεν μπορεί να παγώσει, η οποία ανήκει στα κανονικά φαινόμενα).

- ΜΊΓΜΑ 5×L-RT HEROTM: Περιέχει Foregene Lncrna αντίστροφο Transcriptase, RNase ανασταλτικός παράγοντας, DNTPS, Stabilifer, ανυψωτής, Optimizer, οληγο (DT) εγχυτήρας 18).

Features&advantages:

- Αποδοτική δυνατότητα να αφαιρέσει gDNA, η οποία μπορεί να αφαιρέσει gDNA στο πρότυπο μέσα σε 2 λεπτά.

- Μπορεί αποτελεσματικά να αντιστρέψει τη μεταγραφή του lncRNA. Όταν το αντίστροφο προϊόν μεταγραφής υποβάλλεται στο qPCR, η αξία CT είναι χαμηλότερη από αυτή του συμβατικού αντίστροφου συστήματος μεταγραφής.

- Το αποδοτικό αντίστροφο σύστημα μεταγραφής, αυτό διαρκεί μόνο 15 λεπτά για να ολοκληρώσει τη σύνθεση του πρώτου σκέλους cDNA.

- Σύνθετα πρότυπα: τα πρότυπα με την υψηλή ικανοποιημένη και σύνθετη δευτεροβάθμια δομή ΑΕΡΙΑΣ ΧΡΩΜΑΤΟΓΡΑΦΊΑΣ μπορούν επίσης να αντιστραφούν με την υψηλή αποδοτικότητα.

- Το αντίστροφο σύστημα μεταγραφής υψηλός-ευαισθησίας, PG-ισόπεδα πρότυπα μπορεί επίσης να πάρει υψηλής ποιότητας cDNA.

- Το αντίστροφο σύστημα μεταγραφής έχει την υψηλή θερμική σταθερότητα, η βέλτιστη θερμοκρασία αντίδρασης είναι 42℃, και έχει ακόμα την καλή αντίστροφη εκτέλεση μεταγραφής σε 50℃.

Απαιτήσεις RNA προτύπων

Είναι καλύτερο να χρησιμοποιηθεί το RNA που εξάγεται από τα φρέσκα δείγματα ή που συντηρείται σε -80 °C.

- Ακεραιότητα προτύπων: καλή ακεραιότητα, καμία υποβάθμιση.

- Αγνότητα προτύπων: Τα ΙΟΝΤΑ, οι πρωτεΐνες, EDTA, η αιθανόλη, οι φαινόλες και άλλα περιοδικά που περιλαμβάνονται στο RNA έχουν επιπτώσεις στην αντίστροφη δραστηριότητα transcriptase και έχουν επιπτώσεις τελικά στα αντίστροφα αποτελέσματα μεταγραφής.

Δόση RNA προτύπων

- Για το lncRNA: 10ng-1 συνολικό RNA/20 σύστημα μl μg.

- Για το γενικό RNA: 0.1pg-1 συνολικό RNA μg ή σύστημα μl 0.01pg-0.1 μg mRNA/20.

Πληροφορίες τμημάτων εξαρτήσεων

- 5×gDNase μίγμα: gDNA απομακρύνοντας τον πράκτορα, είναι απαραίτητο να χρησιμοποιηθεί το αντιδραστήριο σύμφωνα με τις οδηγίες λειτουργίας προτού να εκτελεσθεί η RT αντίδραση (η εσωτερική περιεκτικότητα σε γλυκερίνη δεν μπορεί να παγώσει, και δεν μπορεί να παγώσει, η οποία ανήκει στα κανονικά φαινόμενα).

- ΜΊΓΜΑ 5×L-RT HEROTM: Περιέχει Foregene Lncrna αντίστροφο Transcriptase, RNase ανασταλτικός παράγοντας, DNTPS, Stabilifer, ανυψωτής, Optimizer, οληγο (DT₎ εγχυτήρας ₁₈).

Προφυλάξεις: (Παρακαλώ διαβασμένος τις προφυλάξεις προσεκτικά πρίν χρησιμοποιεί την εξάρτηση)

- Το πρότυπο συστήνει τα φρέσκο δείγματα ή το RNA που συντηρούνται κάτω από -80 ° Γ (το RNA πρέπει να αποφύγει επαναλαμβανόμενος freeze-thaw, μην εξασφαλίζοντας την ακεραιότητα RNA, καμία υποβάθμιση).

- Προκειμένου να αποφευχθεί RNASE η ρύπανση, η πειραματική λειτουργία διενεργείται στο RNase-ελεύθερο διάστημα το κεφάλι πυροβόλων όπλων και PCR υποβάλλουν σε φυγοκέντρωση πρέπει να εγγυηθούν για να είναι RNASE-ελεύθερα και γάντια και μάσκες ένδυσης μίας χρήσης.

- Πρίν χρησιμοποιούν, το μίγμα 5 × GDNase και το ΜΊΓΜΑ 5 × λ-rt HEROTM τοποθετούνται στον πάγο το καθιστούν εντελώς λειωμένο, και η ελαφριά σφαίρα αναμιγνύεται το σύστημα διατυπώνεται, παρακαλώ λειτουργήστε σε ένα λουτρό πάγου για να βελτιώσετε την απόδοση της εξάρτησης, βελτιώνει την απόδοση της PCR εξαρτήσεων ιδιομορφίας ενίσχυσης.

- το ΜΊΓΜΑ 5 × λ-rt HEROTM έχει προσθέσει μια βελτιστοποιημένη αναλογία αντίστροφος εγχυτήρας μεταγραφής χωρίς προσθήκη οποιωνδήποτε εγχυτήρων στους πρόσθετους πρόσθετους εγχυτήρες.

- Για το σύνθετο πρότυπο RNA της δευτεροβάθμιας δομής, η θερμοκρασία αντίδρασης μπορεί να αυξηθεί σε 50 ° Γ

Ροή της δουλειάς:

Αποθήκευση και ζωή του προϊόντος στο ράφι:

Οι έξοχες PCR προμίξεων εξαρτήσεις πρέπει να αποθηκευτούν στο κατάστημα -20°C. το προϊόν σε ένα σταθερό ψυγείο θερμοκρασίας σε -20°C αμέσως μετά από την παραλαβή. Εάν οι όροι αποθήκευσης είναι κατάλληλοι, το προϊόν δεν θα υποβιβάσει οποιαδήποτε απόδοση κατά τη διάρκεια της ενός έτους περιόδου ισχύος.

Οδηγός ανάλυσης προβλήματος

Ο ακόλουθος είναι μια ανάλυση των προβλημάτων που μπορούν να αντιμετωπιστούν στη χρήση του lnc-RT HeroTM Ι (με το gDNase) τις εξαρτήσεις σειράς, ελπίζοντας να είναι χρήσιμα στα πειράματά σας. Επιπλέον, έχουμε αφιερώσει τη τεχνική υποστήριξη για να σας βοηθήσουμε με άλλα πειραματικό ή τεχνικά προβλήματα πέρα από τις οδηγίες λειτουργίας και τις ερωτήσεις. Εάν έχετε οποιεσδήποτε ανάγκες, παρακαλώ μας ελάτε σε επαφή με: 028-83361257 ή ηλεκτρονικό ταχυδρομείο: Το Tech@foregene.com.

Μη συγκεκριμένη ενίσχυση

1. Αδικαιολόγητο σχέδιο εγχυτήρων

Σύσταση: Εγχυτήρες σχεδίου σύμφωνα με τις αρχές σχεδίου εγχυτήρων.

2. Υπολείμματα γονιδιώματος.

Πρόταση: Σιγουρευτείτε ότι το πρώτο βήμα της θερμοκρασίας αντίδρασης αφαίρεσης gDNA είναι 42°C, και ο χρόνος αντίδρασης μπορεί επίσης να παραταθεί σε 5min.

Κανένα σήμα ενίσχυσης από RT-qPCR

1. Το RNA υποβιβάζεται.

Σύσταση: Το υλικό για την εξαγωγή RNA πρέπει να είναι όσο το δυνατόν φρεσκότερο, και το υψηλής ποιότητας και high-purity RNA πρέπει να χρησιμοποιηθεί.

2. Το RNA περιέχει τους ανασταλτικούς παράγοντες.

Σύσταση: Οι αντίστροφοι ανασταλτικοί παράγοντες μεταγραφής περιλαμβάνουν γενικά SDS, guanidine τα άλατα, EDTA, κ.λπ. Συστήνεται να πλυθεί το ίζημα RNA με την αιθανόλη 70% για να αφαιρέσει τους ανασταλτικούς παράγοντες.

3. Ζητήματα σχεδίου εγχυτήρων.

Σύσταση: Σύμφωνα με την αρχή σχεδίου εγχυτήρων, ξανασχεδιάστε τους εγχυτήρες για την επιθεώρηση.

Η ζώνη στόχων εμφανίζεται στον κενό έλεγχο

1. Μόλυνση των λειτουργούντων εργαλείων ή των αντιδραστηρίων.

Σύσταση: Όλος τα αντιδραστήρια ή ο εξοπλισμός για το πείραμα πρέπει να αποστειρωθούν. Να είστε προσεκτικός και ευγενής κατά τη χειρισμό για να αποτρέψει τα δείγματα DNA από την απορρόφηση στο σιφώνιο ή ανατροπή από το σωλήνα φυγοκεντρωτών.

2. Η μόλυνση εμφανίστηκε κατά τη διάρκεια της προετοιμασίας του PCR συστήματος αντίδρασης.

Σύσταση: Πάρτε τις απαραίτητες προφυλάξεις κατά το χειρισμό, όπως: φορώντας τα γάντια λατέξ, που χρησιμοποιούν τις άκρες φίλτρων. Χρήση πραγματική - χρονικό PCR μίγμα σε ένα σύστημα μόλυνση-απόδειξης.

3. Οι εγχυτήρες υποβιβάζονται.

Πρόταση: Χρησιμοποιήστε την ηλεκτροφόρηση sds-ΣΕΛΙΔΩΝ για να ανιχνεύσετε εάν οι εγχυτήρες υποβιβάζονται, και αντικαταστήστε με τους νέους εγχυτήρες για τα πειράματα ανίχνευσης φθορισμού.