Εξάρτηση de-05011/05012/05013 απομόνωσης DNA ζωικού ιστού για τον καθαρισμό DNA Genomic

Εξάρτηση το Cat.No.DE απομόνωσης DNA ζωικού ιστού - 05011/05012/05013 για τον καθαρισμό DNA Genomic από τα καλλιεργημένα κύτταρα και το ζώο

Εξάρτηση απομόνωσης DNA ζωικού ιστού

Το Cat.No.DE - 05011/05012/05013

Για το genomic καθαρισμό DNA από τα καλλιεργημένα κύτταρα και τους ζωικούς ιστούς

Προϊόν Descprition:

Αυτή η εξάρτηση χρησιμοποιεί μια DNA-μόνη στήλη που μπορεί συγκεκριμένα να δεσμεύσει το DNA, την πρωτεάση Foregene και ένα μοναδικό σύστημα απομονωτών. Το υψηλής ποιότητας genomic DNA μπορεί να εξαχθεί από τα διάφορα καλλιεργημένα κύτταρα και τους ζωικούς ιστούς μέσα σε 30 έως 50 λεπτά.

Η DNA-μόνη μεμβράνη πηκτωμάτων πυριτίου που χρησιμοποιείται στη στήλη περιστροφής είναι μοναδικό νέο υλικό Foregene, που μπορεί αποτελεσματικά και συγκεκριμένα να δεσμεύσει στο DNA, και να μεγιστοποιήσει την αφαίρεση του RNA, των πρωτεϊνών ακαθαρσιών, των ιόντων και άλλων οργανικών ενώσεων στα κύτταρα. 5-80μg το υψηλής ποιότητας genomic DNA μπορεί να καθαριστεί από τον ιστό 10-50mg.

Τμήματα προϊόντων:

Features&advantages:

- Καμία RNase μόλυνση: Η DNA-μόνη στήλη που παρέχεται στην εξάρτηση το καθιστά πιθανό να αφαιρέσει το RNA από το genomic DNA χωρίς πρόσθετο RNase κατά τη διάρκεια του πειράματος, με αυτόν τον τρόπο αποτρέποντας το εργαστήριο από τη μόλυνση από εξωγενές RNase.

- Γρήγορη ταχύτητα: Η πρωτεάση Foregene αναπτύσσει την υψηλότερη δραστηριότητα από τις παρόμοιες πρωτεάσεις και αφομοιώνει τα δείγματα ιστού γρηγορότερα

- Απλός: η genomic λειτουργία καθαρισμού DNA μπορεί να ολοκληρωθεί σε 50 λεπτά.

- Κατάλληλος: Η φυγοκεντρικότητα εκτελείται στη θερμοκρασία δωματίου, η φυγοκεντρικότητα 4℃ και η πτώση αιθανόλης του DNA δεν απαιτούνται.

- Ασφάλεια: κανένα οργανικό αντιδραστήριο δεν χρησιμοποιείται.

- Υψηλή ποιότητα: Το καθαρισμένο genomic DNA έχει τα μεγάλα τεμάχια, κανένα RNA, κανένα RNase, και εξαιρετικά - χαμηλό ιονικό περιεχόμενο, το οποίο μπορεί να καλύψει τις απαιτήσεις των διάφορων πειραμάτων.

Εφαρμογές του genomic DNA:

Το genomic DNA που καθαρίζεται από την εξάρτηση απομόνωσης DNA ζωικού ιστού έχει την υψηλή αγνότητα και μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τις στερεότυπες μοριακές διαδικασίες της βιολογίας, όπως: ενζυμική πέψη, PCR, νότια υβριδοποίηση, κατασκευή βιβλιοθηκών και άλλα πειράματα.

Έλεγχος ποιότητας των προϊόντων:

Σύμφωνα με το συνολικό ποιοτικό σύστημα διαχείρισης FOREGENE, κάθε batch εξαρτήσεων απομόνωσης DNA ζωικού ιστού είναι αυστηρά δοκιμασμένοι πολλαπλάσιοι χρόνοι να εξασφαλιστεί η αξιοπιστία και η σταθερότητα της ποιότητας κάθε batch εξαρτήσεων.

Παραγωγή και αγνότητα εξαγωγής DNA Genomic:

Η παραγωγή εξαγωγής του genomic DNA ζωικού ιστού συσχετίζεται με την πηγή ιστού, τους όρους αποθήκευσης, το χρόνο αποθήκευσης, τη δόση και άλλους παράγοντες. Η αγνότητα του αποκτηθε'ντος genomic DNA συναντά τη στερεότυπη μοριακή πειραματική λειτουργία της βιολογίας, και OD260/280 του είναι μεταξύ 1.7-1.9. Η παραγωγή του genomic DNA που εξάγεται χρησιμοποιώντας αυτήν την εξάρτηση παρουσιάζεται στον ακόλουθο πίνακα:

Προφυλάξεις: (Παρακαλώ να είστε βέβαιος να διαβάσει τις προφυλάξεις προσεκτικά πρίν χρησιμοποιεί την εξάρτηση)

- Το δείγμα πρέπει να αποφύγει το επαναλαμβανόμενο πάγωμα και το ξεπαγώνω, διαφορετικά τα αποσπασματικά τεμάχια DNA θα είναι μικρότερα και η παραγωγή εξαγωγής θα μειωθεί.

- Πρίν χρησιμοποιεί την εξάρτηση, προσεκτικά ελέγξτε εάν υπάρχει πτώση στον απομονωτή L1, τον απομονωτή L2 και τον απομονωτή PW. Εάν υπάρχει πτώση, παρακαλώ την διαλύστε σε 37℃, αναμιγνύει καλά πριν τη χρήση.

- Πρίν χρησιμοποιεί την εξάρτηση, να είστε βέβαιος να ελέγξει εάν το WB απομονωτών προστίθεται με την άνυδρη αιθανόλη σύμφωνα με τις οδηγίες. Το WB απομονωτών προστέθηκε με την άνυδρη αιθανόλη 60ml (de-05011), την άνυδρη αιθανόλη 120ml (de-05012) και την άνυδρη αιθανόλη 300ml (de-053013) πριν τη χρήση.

- Όγκος εκλεκτικής προσρόφησης: Ο απομονωτής EB δεν πρέπει να είναι λιγότερο από 100μl, διαφορετικά έχει επιπτώσεις στην παραγωγή DNA.

- Θυμηθείτε να μην προσθέσετε RNase σε οποιοδήποτε απομονωτή.

- Όλα τα βήματα φυγοκεντρικότητας υποβάλλονται σε φυγοκέντρωση στη θερμοκρασία δωματίου (15-25℃) χρησιμοποιώντας έναν υπολογιστή γραφείου υποβάλλουν.

- Όλα τα πειραματικά βήματα πραγματοποιήθηκαν στη θερμοκρασία δωματίου (15-25℃).

Αποθήκευση και ζωή του προϊόντος στο ράφι:

- Η εξάρτηση μπορεί να αποθηκευτεί για 12 μήνες στη θερμοκρασία δωματίου (15-25℃), ή 2-8℃ για τον πιό μακροχρόνιο χρόνο.

Σημείωση: Εάν αποθηκεύεται στη χαμηλή θερμοκρασία, η λύση είναι επιρρεπής σε πτώση. Πριν τη χρήση, να είστε βέβαιος να τοποθετήσει τη λύση στην εξάρτηση στη θερμοκρασία δωματίου για μια χρονική περίοδο. Εάν είναι απαραίτητο, τον προθερμάνετε σε ένα νερό 37℃ - λουτρό για 10 λεπτά για να διαλύσετε το ίζημα, και τον αναμίξτε πριν τη χρήση.

- Η λύση πρωτεάσεων Foregene έχει έναν μοναδικό τύπο και είναι ενεργός για πολύ καιρό (3 μήνες) στη θερμοκρασία δωματίου η δραστηριότητα και η σταθερότητά της θα είναι καλύτερες όταν αποθηκεύεται σε 4℃, έτσι συστήνεται να αποθηκευτεί σε 4℃, να θυμηθεί να μην το αποθηκεύσει σε -20℃ εκτός από.

DNA-μόνο χαρακτήρες στηλών

*: Το ελάχιστο σύστημα εκλεκτικής προσρόφησης 100μl είναι ένας λογικός συνιστώμενος όγκος που δίνεται λαμβάνοντας υπόψη το ποσοστό αποκατάστασης DNA και τη συγκέντρωση. Εάν προκειμένου να αυξηθεί η παραγωγή του DNA, ο όγκος eluate μπορεί να αυξηθεί κατάλληλα εάν προκειμένου να αυξηθεί η συγκέντρωση του καθαρισμένου DNA, ο όγκος eluate μπορεί να μειωθεί κατάλληλα στην προϋπόθεση της θυσίας ενός μέρους της παραγωγής DNA, όπως η χρησιμοποίηση ενός συστήματος εκλεκτικής προσρόφησης 50μl, προκειμένου να ληφθούν οι υψηλότερες συγκεντρώσεις του DNA.

Παραγωγή και αγνότητα εξαγωγής DNA Genomic

Η παραγωγή εξαγωγής του genomic DNA ζωικού ιστού συσχετίζεται με την πηγή ιστού, τους όρους αποθήκευσης, το χρόνο αποθήκευσης, τη δόση και άλλους παράγοντες. Η αγνότητα του αποκτηθε'ντος genomic DNA συναντά τη στερεότυπη μοριακή πειραματική λειτουργία της βιολογίας, και OD260/280 του είναι μεταξύ 1.7-1.9. Η παραγωγή του genomic DNA που εξάγεται χρησιμοποιώντας αυτήν την εξάρτηση παρουσιάζεται στον ακόλουθο πίνακα:

Σημείωση: Το στοιχείο σε αυτόν τον πίνακα είναι για την αναφορά μόνο. Σε πραγματική λειτουργία, τα στοιχεία αποκτηθε'ντα θα είναι ελαφρώς διαφορετικά από τα στοιχεία σε αυτόν τον πίνακα λόγω των παραγόντων όπως οι όροι αποθήκευσης και η λειτουργούσα ικανότητα των υλικών χρησιμοποιούμενων.

Ροή της δουλειάς

Οδηγός ανάλυσης προβλήματος

Ο ακόλουθος είναι μια ανάλυση των προβλημάτων που μπορούν να αντιμετωπιστούν στην εξαγωγή του genomic DNA από τα δείγματα ιστού, ελπίζοντας να είναι χρήσιμα στα πειράματά σας. Επιπλέον, για άλλα πειραματικό ή τεχνικά προβλήματα εκτός από τις οδηγίες λειτουργίας και την ανάλυση προβλήματος, έχουμε αφιερώσει τη τεχνική υποστήριξη για να σας βοηθήσουμε. Εάν έχετε οποιεσδήποτε ανάγκες, παρακαλώ μας ελάτε σε επαφή με: 028-83360257 ή ε-Μαλί: Το Tech@foregene.com.

Χαμηλή παραγωγή ή κανένα DNA

Υπάρχουν συνήθως πολλαπλάσιοι παράγοντες που έχουν επιπτώσεις στην παραγωγή του genomic DNA, συμπεριλαμβανομένης της πηγής δειγμάτων, των όρων αποθήκευσης δειγμάτων, της προεπεξεργασίας δειγμάτων, του χειρισμού, κ.λπ.

Το DNA Genomic δεν θα μπορούσε να ληφθεί κατά τη διάρκεια της εξαγωγής

1. Τα δείγματα ιστού αποθηκεύονται εσφαλμένα ή αποθηκεύονται για πάρα πολύ καιρό, με συνέπεια την υποβάθμιση του genomic DNA.

Σύσταση: Δείγματα ιστού καταστημάτων στο υγρό άζωτο ή -80°C προσπαθήστε να χρησιμοποιήσετε τα πρόσφατα συλλεχθε'ντα δείγματα ιστού για τη genomic εξαγωγή DNA.

2. Ελάχιστα η κατανάλωση ιστού μπορεί να οδηγήσει στην αποτυχία να εξαχθεί το αντίστοιχο genomic DNA.

Πρόταση: Για τα δείγματα ιστού που έχουν αποθηκευτεί για πολύ καιρό ή έχουν την αυστηρή genomic υποβάθμιση DNA, το ποσό δειγμάτων ιστού μπορεί να αυξηθεί κατάλληλα προκειμένου να εξαχθεί το ιδιαίτερο genomic DNA. Το ποσό δείγματος μπορεί να καθοριστεί σύμφωνα με τις ανάγκες DNA, αλλά δεν πρέπει να υπερβεί 50mg.

3. Ανάρμοστη αποθήκευση των αποτελεσμάτων πρωτεάσεων Foregene στη μειωμένη ή αδρανοποιημένη δραστηριότητα.

Σύσταση: Επιβεβαιώστε τους όρους αποθήκευσης της πρωτεάσης Foregene ή το αντικαταστήστε με μια νέα πρωτεάση Foregene για την ενζυματική υδρόλυση.

4. Η εξάρτηση αποθηκεύεται εσφαλμένα ή αποθηκεύεται για πάρα πολύ καιρό, αναγκάζοντας μερικά συστατικά στην εξάρτηση για να αποτύχει.

Σύσταση: Αγοράστε μια νέα εξάρτηση εξαγωγής DNA ζωικού ιστού genomic για τις σχετικές διαδικασίες.

5. Ανάρμοστη χρήση της εξάρτησης. Παραδείγματος χάριν, μερικές ειδικές εξαρτήσεις ανάγκης ιστών για την επεξεργασία.

Σύσταση: Η αγορά μιας εξάρτησης για τα δείγματα, όπως η εξαγωγή του εδαφολογικού genomic DNA, απαιτεί μια αφιερωμένη εξάρτηση απομόνωσης εδαφολογικού DNA.

6. WB απομονωτών χωρίς προσθήκη της άνυδρης αιθανόλης.

Σύσταση: Σιγουρευτείτε για να προσθέσετε το σωστό όγκο της άνυδρης αιθανόλης για να αποθηκεύσει το WB.

7. Eluent δεν στάχτηκε επάνω στη μεμβράνη πυριτίου κατάλληλα.

Πρόταση: Προσθέστε προθερμασμένο eluent σε 65°C dropwise στη μέση της μεμβράνης πηκτωμάτων πυριτίου, και το αφήστε στη θερμοκρασία δωματίου για 5 λεπτά για να αυξήσετε την αποδοτικότητα εκλεκτικής προσρόφησης.

Αποσπασματικό genomic DNA με τη χαμηλή παραγωγή

1. Το δείγμα αποθηκεύεται εσφαλμένα ή αποθηκεύεται για πάρα πολύ καιρό, με συνέπεια την υποβάθμιση του genomic DNA.

Σύσταση: Δείγματα ιστού καταστημάτων στο υγρό άζωτο ή -80 προσπαθήστε να χρησιμοποιήσετε τα πρόσφατα συλλεχθε'ντα δείγματα ιστού για τη genomic εξαγωγή DNA.

2. Εάν το ποσό δειγμάτων ιστού είναι πάρα πολύ μικρό, το αποσπασματικό genomic DNA θα είναι λιγότεροι.

Πρόταση: Για τα δείγματα ιστού που έχουν αποθηκευτεί για πολύ καιρό ή έχουν την αυστηρή genomic υποβάθμιση DNA, το ποσό δειγμάτων ιστού μπορεί να αυξηθεί κατάλληλα για να λάβει το ιδιαίτερο genomic DNA. Το ποσό δείγματος μπορεί να καθοριστεί σύμφωνα με τις ανάγκες DNA, αλλά δεν πρέπει να υπερβεί 50mg.

3. Το υπερβολικό ποσό δείγματος θα οδηγήσει στην ελλιπή πέψη και την ελλιπή φυγοκεντρικότητα. Η στήλη καθαρισμού μπορεί να εμποδιστεί κατά τη διάρκεια της φυγοκεντρικότητας στη στήλη, και το αποσπασματικό genomic DNA θα είναι λιγότεροι.

Πρόταση: Σύμφωνα με τους διαφορετικούς ιστούς, η δόση πρέπει να ρυθμιστεί μέσα σε 10-50 mg. Όταν η πέψη είναι ελλιπής ή η στήλη καθαρισμού εμποδίζεται, παρακαλώ μειώστε την αντίστοιχη δόση ιστού.

4. Το δείγμα δεν προεπεξεργάζεται ή προεπεξεργάζεται ημιτελώς.

Πρόταση: Τα ειδικά συντηρημένα δείγματα ή μερικά σχετικά ειδικά δείγματα πρέπει να επεξεργαστούν εκ των προτέρων πριν από την ενζυματική υδρόλυση, η οποία μπορεί να αφαιρέσει τη λύση ή τους παράγοντες συντήρησης δειγμάτων που έχει επιπτώσεις στη δραστηριότητα πρωτεάσεων, έτσι ώστε η ενζυματική αντίδραση υδρόλυσης μπορεί να πραγματοποιηθεί πιό λεπτομερώς, και το υψηλότερο genomic DNA παραγωγής μπορεί να ληφθεί.

5. Ειδικά συντηρημένα δείγματα ιστού, όπως η παραφίνη-ενσωματωμένη, ουρά αρουραίων, κ.λπ.

Σύσταση: Αγοράστε μια αφιερωμένη genomic εξάρτηση εξαγωγής DNA, όπως τα παραφίνη-ενσωματωμένα δείγματα, μπορείτε να επιλέξετε την εξάρτηση απομόνωσης DNA ΟΕΔΔ (ΟΜΟΣΠΟΝΔΊΑ ΕΥΡΩΠΑΪΚΉΣ ΔΗΜΌΣΙΑΣ ΔΙΟΊΚΗΣΗΣ) τα δείγματα ουρών ποντικιών, εσείς μπορούν να επιλέξουν τη μίνι εξάρτηση DNA ουρών ποντικιών. Αυτοί οι ιστοί αντιμετωπίζονται με τις ειδικές εξαρτήσεις τους, και η παραγωγή εξαγωγής DNA θα είναι υψηλότερη και η επίδραση θα είναι ιδανικότερη.

6. Ανάρμοστη αποθήκευση των αποτελεσμάτων πρωτεάσεων Foregene στη μειωμένη ή αδρανοποιημένη δραστηριότητα.

Σύσταση: Επιβεβαιώστε τους όρους αποθήκευσης της πρωτεάσης Foregene ή το αντικαταστήστε με μια νέα πρωτεάση Foregene για την ενζυματική υδρόλυση.

7. Το eluent πρόβλημα.

Σύσταση: Παρακαλώ χρησιμοποιήστε τον απομονωτή EB για την εκλεκτική προσρόφηση εάν χρησιμοποιώντας ddH₂ Ο ή άλλα eluents, σιγουρευτείτε το pH eluent είναι μεταξύ 7.0-8.5.

8. Eluent δεν προστέθηκε dropwise σωστά.

Πρόταση: Παρακαλώ προσθέστε την πτώση εκλεκτικής προσρόφησης στη μέση της μεμβράνης πυριτίου και το αφήστε στη θερμοκρασία δωματίου για 5 λεπτά για να αυξήσετε την αποδοτικότητα εκλεκτικής προσρόφησης.

9. Ο eluent όγκος είναι πάρα πολύ χαμηλός.

Πρόταση: Παρακαλώ χρησιμοποιήστε eluent για τη genomic εκλεκτική προσρόφηση DNA σύμφωνα με τις οδηγίες, τουλάχιστον περισσότερο από 100μl.

Αποσπασματικό genomic DNA με τη χαμηλή αγνότητα

Η χαμηλή αγνότητα του genomic DNA θα οδηγήσει στην αποτυχία ή την ανεπαρκή επίδραση των προς τα κάτω πειραμάτων, όπως: το ένζυμο δεν μπορεί να κοπεί, και το τεμάχιο γονιδίων στόχων δεν μπορεί να ληφθεί από PCR.

1. Διάφορη πρωτεϊνική μόλυνση, μόλυνση RNA.

Ανάλυση: Ο απομονωτής PW δεν χρησιμοποιήθηκε για να πλύνει τη στήλη Ο απομονωτής PW δεν χρησιμοποιήθηκε για να πλύνει τη στήλη με τη σωστή ταχύτητα φυγοκεντρικότητας.

Σύσταση: Προσπαθήστε να εξασφαλίσετε ότι δεν υπάρχει καμία πτώση στο υπερκείμενο νερό όταν περνούν το υπερκείμενο νερό μέσω της στήλης να είστε βέβαιος να πλύνει τη στήλη καθαρισμού με τον απομονωτή PW σύμφωνα με τις οδηγίες, και αυτό το βήμα δεν μπορεί να παραλειφθεί.

2. Ιονική ρύπανση ακαθαρσιών.

Ανάλυση: Η στήλη πλυσίματος WB απομονωτών παραλείφθηκε ή πλύθηκε μόνο μιά φορά, με συνέπεια την υπόλοιπη ιοντική μόλυνση.

Σύσταση: Να είστε βέβαιος να πλύνει δύο φορές με το WB απομονωτών σύμφωνα με τις οδηγίες για να αφαιρέσει τα υπόλοιπα ιόντα όσο το δυνατόν περισσότερο.

3. RNase μόλυνση.

Ανάλυση: Εξωγενές RNase προστίθεται στον απομονωτή η ανακριβής λειτουργία πλύσης απομονωτών PW οδηγεί υπόλοιπο RNase, που έχει επιπτώσεις στις προς τα κάτω πειραματικές διαδικασίες RNA, όπως η τεχνητή μεταγραφή.

Πρόταση: Οι εξαρτήσεις εξαγωγής νουκλεϊνικού οξέος σειράς Foregene μπορούν να αφαιρέσουν το RNA χωρίς πρόσθετο RNase, και όλα τα αντιδραστήρια στην εξάρτηση απομόνωσης DNA ζωικού ιστού δεν χρειάζονται RNase να είστε βέβαιος να πλύνει τη στήλη καθαρισμού με τον απομονωτή PW σύμφωνα με τις οδηγίες, και αυτό το βήμα δεν μπορεί να παραλειφθεί.

4. Υπολείμματα αιθανόλης.

Ανάλυση: Μετά από να πλύνει τη στήλη καθαρισμού με το WB απομονωτών, καμία κενή φυγοκεντρικότητα σωλήνων δεν εκτελέσθηκε.

Σύσταση: Ακολουθήστε τις οδηγίες για την κατάλληλη κενή φυγοκεντρικότητα σωλήνων.

5. Άλλη ρύπανση ακαθαρσιών.

Ανάλυση: Τα σωζόμενα δείγματα ή τα ειδικά δείγματα δεν προεπεξεργάστηκαν.

Σύσταση: Λεπτομερώς επεξεργαστείτε εκ των προτέρων το δείγμα σύμφωνα με τις οδηγίες λειτουργίας.