PCR σπόρου εγκαταστάσεων άμεση εξάρτηση ι-UNG για τους σπόρους εγκαταστάσεων που περιέχουν τα χαμηλά τμήματα πολυσακχαριτών και polyphenol

Περιγραφή:

PCR σπόρου εγκαταστάσεων η άμεση εξάρτηση ι-UNG χρησιμοποιεί ένα μοναδικό σύστημα αντίδρασης λύσης, το οποίο μπορεί γρήγορα να απελευθερώσει το genomic DNA από τα δείγματα σπόρου εγκαταστάσεων με τη χαμηλή περιεκτικότητα σε πολυσακχαρίτες και polyphenol (όπως: το ρύζι, ο σίτος, ο καπνός, το καλαμπόκι, η σόγια, κ.λπ.) για τη χρήση PCR στις αντιδράσεις, έτσι αυτό είναι ιδιαίτερα κατάλληλη μεγάλης κλίμακας γενετική δοκιμή. Προκειμένου να ικανοποιηθούν οι ανάγκες των διαφορετικών δοκιμών ανίχνευσης, αυτή η εξάρτηση μπορεί να χρησιμοποιήσει τους πολλαπλάσιους τύπους δειγμάτων (όπως ολόκληροι οι σπόροι, οι μικρές περικοπές ιστού, ή τα επίγεια δείγματα των πολλαπλάσιων σπόρων) για τα πειράματα. Μεταξύ τους, για τα δείγματα σπόρου που πρέπει ακόμα να βλαστηθούν, μπορείτε να επιλέξετε να αποκόψετε τις περικοπές μικροϋπολογιστής-ιστού (1-5mg) εκτός από το έμβρυο σπόρου για το πείραμα για τα πειράματα που πρέπει να επιλεχτούν σε έναν μεγάλο αριθμό δειγμάτων, μπορείτε να επιλέξετε να αναμίξετε τα πολλαπλάσια δείγματα και να τα συνδυάσετε. Μετά από να αλέσει στα μόρια με μια διάμετρο περίπου 0.5mm, το πείραμα μπορεί να πραγματοποιηθεί (τουλάχιστον 0,1% του δείγματος στόχων μπορεί να ανιχνευθεί).

Η διαδικασία το genomic DNA από το σύστημα αντίδρασης σχισίματος μπορεί να ολοκληρωθεί μέσα σε 5-10 λεπτά. Δεν υπάρχει καμία ανάγκη για άλλες διαδικασίες να αφαιρεθεί η πρωτεΐνη, το RNA ή οι δευτεροβάθμιοι μεταβολίτες, και τα αποδεσμευμένα ποσά ιχνών του DNA μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως πρότυπο για PCR τις αντιδράσεις.

2× PCR EasyTM σπόρου το μίγμα έχει την ισχυρή ανοχή PCR στους ανασταλτικούς παράγοντες αντίδρασης, και μπορεί άμεσα να χρησιμοποιήσει το μίγμα λύσης φυτικών ιστών ως πρότυπο για την αποδοτική και συγκεκριμένη ενίσχυση. Αυτό το αντιδραστήριο περιέχει την πολυμεράση DNA δ-Taq της επιχείρησης, dNTPs, MgCl2, τον απομονωτή αντίδρασης, PCR τον ανυψωτή αντίδρασης, optimizer, και το σταθεροποιητή που τροποποιείται ειδικά για άμεσο PCR. Χρησιμοποιημένο από κοινού με τη λύση το σύστημα αντίδρασης μπορεί γρήγορα και εύκολα να ανιχνεύσει τα δείγματα, και έχει τα χαρακτηριστικά της υψηλής ευαισθησίας, της ισχυρής ιδιομορφίας, και της καλής σταθερότητας.

2× PCR EasyTM σπόρου το μίγμα (UNG) χρησιμοποιεί dUTP αντί του dTTP βάσει PCR EasyTM σπόρου 2× του μίγματος, και προσθέτει το ένζυμο UNG (ουρακίλη-ν-Glycosylase) που μπορεί να υποβιβάσει το πρότυπο που περιέχει dUTP συγχρόνως. Πριν από τη PCR αντίδραση, το ένζυμο UNG χρησιμοποιείται για να υποβιβάσει το PCR προϊόν που περιέχει την ουρακίλη. Το ένζυμο UNG δεν θα έχει οποιαδήποτε επίδραση στο πρότυπο που δεν περιέχει την ουρακίλη, με αυτόν τον τρόπο εξασφαλίζοντας την ιδιομορφία και την ακρίβεια της ενίσχυσης και αποτρέποντας τη δυνατότητα της μεγάλης κλίμακας γενετικής δοκιμής. Η μόλυνση PCR των προϊόντων εμφανίστηκε

Η πολυμεράση DNA δ-Taq είναι μια πολυμεράση DNA που αναπτύσσεται ειδικά από Foregene για τις άμεσες PCR αντιδράσεις. Η πολυμεράση DNA δ-Taq έχει την ισχυρή ανοχή σε ποικίλους PCR ανασταλτικούς παράγοντες αντίδρασης, και μπορεί αποτελεσματικά να ενισχύσει τα ποσά ιχνών του DNA στα διάφορα σύνθετα συστήματα αντίδρασης, και η ταχύτητα ενίσχυσης μπορεί να φθάσει σε 2Kb/min, το οποίο είναι ιδιαίτερα κατάλληλο για την άμεση PCR αντίδραση.

Σύμφωνα με τις διαφορές στα δείγματα εγκαταστάσεων, τα προϊόντα διαιρούνται σε δύο κατηγορίες: PCR σπόρου εγκαταστάσεων άμεση εξάρτηση και άμεσο PCR σπόρου εγκαταστάσεων συν την εξάρτηση. Στο στάδιο λύσης, που θεωρεί ότι οι διαφορετικοί τύποι σπόρων ή υλικών ιστού ποικίλλουν πολύ στο ποσό αντιδραστηρίων που χρησιμοποιούνται στη διαδικασία λύσης, οι πελάτες μπορούν να επιλέξουν τον αντίστοιχο PCR σπόρου εγκαταστάσεων (μικρού και μέσου) άμεσο σπόρο εξαρτήσεων ή εγκαταστάσεων (μεγάλο) σύμφωνα με το μέγεθος της πειραματικής άμεσης PCR υλικών τους εξάρτησης στο PCR στάδιο ανίχνευσης, οι πελάτες μπορούν επίσης να επιλέξουν το συνηθισμένο PCR EasyTM σπόρου 2× μίγμα ή PCR EasyTM σπόρου 2× το μίγμα (UNG) που μπορούν να αποτρέψουν τη μόλυνση PCR των προϊόντων ενίσχυσης σύμφωνα με τις πειραματικές ανάγκες.

Προδιαγραφές:

50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns

Τμήματα εξαρτήσεων:

Features&advantages:

- Κανένας χρονοβόρος και ακριβός καθαρισμός DNA ανάγκης δεν απαιτείται.

- Η απαίτηση δειγμάτων είναι μικρή, πάρτε ακριβώς έναν ενιαίο σπόρο.

- Καμία ειδική μεταχείριση όπως η λείανση και η συντριβή δεν απαιτείται, και η λειτουργία είναι απλή.

- Το βελτιστοποιημένο PCR σύστημα επιτρέπει PCR για να έχει την υψηλότερη ιδιομορφία και την ισχυρότερη ανοχή PCR στους ανασταλτικούς παράγοντες αντίδρασης.

- Το κατά της μόλυνσης PCR PCR EasyTM σπόρου συστημάτων 2× μίγμα (UNG) μπορεί αποτελεσματικά να αποβάλει τη ρύπανση που προκαλείται από PCR τα προϊόντα και να εξασφαλίσει την ιδιομορφία και την ακρίβεια της ενίσχυσης.

Παράμετροι εξαρτήσεων:

Εφαρμογή: Προσδιορισμός των διαγενετικών εγκαταστάσεων, κ.λπ.

Δείγμα: Σπόροι ή ιστοί εγκαταστάσεων με τη χαμηλή περιεκτικότητα σε πολυσακχαρίτες και polyphenol.

Μέγεθος του δείγματος: Ενιαίος ολόκληρος σπόρος, ιστός εγκαταστάσεων 1-100mg

Σειρά ανίχνευσης: PCR προϊόν ≤1kb

Εφαρμογή

- Πεδίο της εφαρμογής: ποικίλοι σπόροι εγκαταστάσεων.

- DNA που απελευθερώνεται από τη λύση δειγμάτων: μόνο χρησιμοποιημένος ως PCR πρότυπο.

- Η εξάρτηση μπορεί να χρησιμοποιηθεί για τους ακόλουθους λόγους: προσδιορισμός των διαγενετικών σπόρων, εγκαταστάσεων, κ.λπ.

Πληροφορίες σύνθεσης εξαρτήσεων

- SP1 απομονωτών: Παρέχει το περιβάλλον που απαιτείται για την αντίδραση λύσης των σπόρων εγκαταστάσεων.

- SP2 απομονωτών: Εξουδετερώστε το lysate έτσι ώστε δεν έχει επιπτώσεις στην επόμενη PCR αντίδραση.

-2× PCR EasyTM σπόρου μίγμα (UNG): Περιέχει την ειδική τροποποιημένη πολυμεράση DNA Taq, το ένζυμο UNG, dNTPs, dUTP, MgCl2, τον απομονωτή αντίδρασης, PCR τον ανυψωτή αντίδρασης, optimizer και το σταθεροποιητή, κ.λπ. Κατά τη διάρκεια της PCR αντίδρασης, προσθέστε ακριβώς το κατάλληλους μίγμα, τους εγχυτήρες, και το ddH2O λύσης στο PCR EasyTM σπόρου 2× μίγμα (UNG) που χρησιμοποιείται για τη PCR αντίδραση.

-6× απομονωτής φόρτωσης DNA: Ο απομονωτής φόρτωσης δεν περιέχει SDS. Συστήνεται να χρησιμοποιηθεί ο απομονωτής φόρτωσης DNA 6× που περιλαμβάνεται με την εξάρτηση κατά την εκτέλεση της ηλεκτροφόρησης πηκτωμάτων αγαρόζης προκειμένου να επιτευχθούν τα καλά αποτελέσματα ηλεκτροφόρησης. Μην χρησιμοποιήστε τον απομονωτή φόρτωσης που περιέχει SDS, διαφορετικά θα υπάρξει μια μεγάλη ουρά του φωτεινού φωτός στην πάροδο κατά τη διάρκεια της ηλεκτροφόρησης, η οποία έχει επιπτώσεις στα πειραματικά αποτελέσματα.

Ροή εργασίας:

Ηλεκτροφερόγραμμα:

Αποθήκευση και ζωή του προϊόντος στο ράφι:

- Το μέρος Ι αυτής της εξάρτησης πρέπει να αποθηκευτεί στη θερμοκρασία δωματίου ή 2-8℃.

vReagents SP1 απομονωτών, SP2 απομονωτών, απομονωτής φόρτωσης DNA 6×, υπό τους ξηρούς όρους, μπορεί να αποθηκευτεί για 12 μήνες. Εάν πρέπει να αποθηκεύσετε την εξάρτηση για έναν πιό μακροχρόνιο χρόνο, μπορείτε να τον αποθηκεύσετε σε 2-8℃.

- Το μέρος ΙΙ αυτής της εξάρτησης πρέπει να αποθηκευτεί σε -20℃.

το vReagent PCR σπόρου 2× εύκολο μίγμα, εάν χρησιμοποιείται συχνά, αυτό μπορεί επίσης να αποθηκευτεί σε 4℃ για τη βραχυπρόθεσμη αποθήκευση (χρήση επάνω μέσα σε 10 ημέρες).

ΠΑΡΑΡΤΗΜΑ Ι

Η σύγκριση μεταξύ άμεσο PCR και παραδοσιακό PCR: