Άμεσο PCR φύλλων φυτού συν PCR εξαρτήσεων UNG το φύλλο φυτού απομονωτών λύσης πολυμεράσεων DNA εξαρτήσεων για τα διαγενετικά φυτά

Άμεσο PCR φύλλων φυτού συν PCR εξάρτηση-UNG το φύλλο φυτών απομονωτών λύσης πολυμεράσεων DNA εξαρτήσεων για τα διαγενετικά φυτά

Περιγραφή:

Άμεσο PCR φύλλων φυτού συν εξάρτηση-UNG υιοθετεί ένα μοναδικό σύστημα απομονωτών λύσης, το οποίο μπορεί γρήγορα να απελευθερώσει το genomic DNA από τα δείγματα φύλλων των φυτών με την υψηλή περιεκτικότητα σε πολυσακχαρίτες και polyphenol (όπως το βαμβάκι, η μπανάνα, κ.λπ.) για PCR την αντίδραση. Τα φύλλα δεν πρέπει να αλεστούν ή να τεμαχιστούν όταν αντιμετωπίζονται με τον απομονωτή λύσης, που καθιστά τους ιδανικούς για τη μεγάλης κλίμακας γενετική δοκιμή.
Η διαδικασία το genomic DNA από τον απομονωτή λύσης μπορεί να ολοκληρωθεί μέσα σε 5-10 λεπτά, χωρίς την ανάγκη για άλλες διαδικασίες deproteinization, του RNA ή των δευτεροβάθμιων μεταβολιτών, και το απελευθερωμένο DNA ιχνών μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως πρότυπο για PCR την αντίδραση.
2× PCR EasyTM φύλλων το μίγμα έχει μια ισχυρή αντίσταση PCR στους ανασταλτικούς παράγοντες αντίδρασης, και μπορεί άμεσα να χρησιμοποιήσει το προϊόν σχισίματος του φυτικού ιστού ως πρότυπο για την αποδοτική και συγκεκριμένη ενίσχυση. Το αντιδραστήριο περιέχει την πολυμεράση DNA δ-Taq, dNTPs, MgCl2, τον απομονωτή αντίδρασης, PCR τον ανυψωτή αντίδρασης, optimizer, και το σταθεροποιητή που κατασκευάζεται ειδικά για τις άμεσες PCR αντιδράσεις. Μπορεί να χρησιμοποιηθεί σε σχέση με με το άμεσο lysate για να ανιχνεύσει τα δείγματα γρήγορα και εύκολα, και έχει τα χαρακτηριστικά της υψηλής ευαισθησίας, της ισχυρής ιδιομορφίας και της καλής σταθερότητας.
2× PCR EasyTM φύλλων το μίγμα (UNG) αντικαθιστά dTTP με το dUTP βάσει PCR φύλλων 2× του μίγματος, και προσθέτει συγχρόνως το ένζυμο UNG (racil-ν-glycosylase) που μπορεί να υποβιβάσει το πρότυπο που περιέχει dUTP. Πριν από τη PCR αντίδραση, το PCR προϊόν που περιέχει την ουρακίλη υποβιβάζεται από UNG το ένζυμο. Το ένζυμο UNG δεν θα έχει οποιαδήποτε επίδραση στο πρότυπο που δεν περιέχει την ουρακίλη, ώστε να εξασφαλιστούν η ιδιομορφία και η ακρίβεια της ενίσχυσης και να αποτραπεί η δυνατότητα της μεγάλης κλίμακας γενετικής δοκιμής. PCR τα προβλήματα μόλυνσης προϊόντων προκύπτουν.
Η πολυμεράση DNA δ-Taq είναι μια πολυμεράση DNA που αναπτύσσεται ειδικά για τις άμεσες PCR αντιδράσεις. Η πολυμεράση DNA δ-Taq έχει την ισχυρή ανοχή σε ποικίλους PCR ανασταλτικούς παράγοντες αντίδρασης, και μπορεί αποτελεσματικά να ενισχύσει τα ποσά ιχνών του DNA στα διάφορα σύνθετα συστήματα αντίδρασης. Η ταχύτητα ενίσχυσης μπορεί να φθάσει σε 2Kb/min. Είναι ιδιαίτερα κατάλληλο για την άμεση PCR αντίδραση.
Σύμφωνα με τις διαφορές των δειγμάτων εγκαταστάσεων, τα προϊόντα διαιρούνται σε δύο κατηγορίες: PCR φύλλων φυτού άμεση εξάρτηση και άμεσο PCR φύλλων φυτού συν την εξάρτηση για τους πολυσακχαρίτες και polyphenols στο PCR στάδιο ανίχνευσης, μπορεί να είναι σύμφωνα με τις πειραματικές ανάγκες, να επιλέξει το κοινό PCR EasyTM φύλλων 2× μίγμα ή το PCR EasyTM φύλλων 2× μίγμα (UNG) που έχει την επίδραση της παρεμπόδισης της μόλυνσης PCR των προϊόντων ενίσχυσης.

Προδιαγραφές:

50×20µl rxns, 200×20µl rxns, 500×20µl rxns, 2000×20µl rxns

Τμήματα εξαρτήσεων:

Χαρακτηριστικά γνωρίσματα & πλεονεκτήματα:

- Κανένας χρονοβόρος και ακριβός καθαρισμός DNA

- Λιγότερο υλικός

- Το απλός-δείγμα μπορεί να υποβληθεί PCR στην αντίδραση ή την αντίδραση λύσης χωρίς την κοπή ή λείανση

Μίγμα-μειώνοντας λάθη φόρτωσης δειγμάτων -2X και χρόνος προετοιμασιών συστημάτων αντίδρασης

- Η προετοιμασία γρήγορος-προτύπων μπορεί να ολοκληρωθεί σε 10 λεπτά, PCR η αντίδραση μπορεί να ολοκληρωθεί σε 50 λεπτά

- Η υψηλή αντίδραση ρυθμοαπόδοση-λύσης μπορεί να ολοκληρωθεί PCR του 96 καλά στο πιάτο

Παράμετροι εξαρτήσεων:

Εφαρμογή: Προσδιορισμός των διαγενετικών εγκαταστάσεων, κ.λπ.

Δείγμα: φύλλα φυτών

Μέγεθος του δείγματος: Διάμετρος 23mm (άμεση μέθοδος), διάμετρος 57mm (μέθοδος λύσης)

Σειρά ανίχνευσης: PCR προϊόν ≤1kb

Πληροφορίες τμημάτων εξαρτήσεων

- Απομονωτής PS1: Παρέχει το περιβάλλον που απαιτείται για την αντίδραση λύσης φύλλων φυτών.

- Απομονωτής PS2: Η συμπλήρωση παρέχει το περιβάλλον που απαιτείται για την αντίδραση λύσης των πολυσακχαριτών και polyphenols στα φύλλα φυτών.

- Απομονωτής P2: Εξουδετερώνει το lysate έτσι ώστε δεν παρεμποδίζει τις επόμενες PCR αντιδράσεις.

- 2× PCR EasyTM φύλλων μίγμα (UNG): Βάσει του φύλλου 2× PCR EasyTM το μίγμα, dUTP χρησιμοποιείται για να αντικαταστήσει dTTP, και συγχρόνως, το ένζυμο UNG που μπορεί να υποβιβάσει το πρότυπο που περιέχει dUTP προστίθεται, το οποίο μπορεί αποτελεσματικά να αποτρέψει τη μόλυνση PCR των προϊόντων ενίσχυσης. Περιέχει την πολυμεράση DNA δ-Taq που τροποποιείται ειδικά από το Φούτζι βιο, UDG, dNTPs, MgCl2, τον απομονωτή αντίδρασης, PCR τον ανυψωτή αντίδρασης, optimizer και το σταθεροποιητή. Για PCR την αντίδραση, προσθέστε ακριβώς το κατάλληλο μίγμα λύσης, εγχυτήρες, ddH2O για PCR EasyTM φύλλων 2× το μίγμα (UNG) και μπορεί να χρησιμοποιηθεί για PCR την αντίδραση.

- 6× απομονωτής φόρτωσης DNA: Αυτός ο απομονωτής φόρτωσης δεν περιέχει SDS. Συστήνεται να χρησιμοποιηθεί ο απομονωτής φόρτωσης DNA 6× που παρέχεται την εξάρτηση κατά την εκτέλεση της ηλεκτροφόρησης πηκτωμάτων αγαρόζης προκειμένου να επιτευχθούν τα καλά αποτελέσματα ηλεκτροφόρησης. Μην χρησιμοποιήστε τον απομονωτή φόρτωσης που περιέχει SDS, διαφορετικά θα υπάρξει μια μεγάλη ουρά του φωτός στην κολυμπώντας πάροδο κατά τη διάρκεια της ηλεκτροφόρησης, η οποία έχει επιπτώσεις στα πειραματικά αποτελέσματα.

Ροή εργασίας:

Ηλεκτροφερόγραμμα:

Αποθήκευση και ζωή του προϊόντος στο ράφι:

Το μέρος Ι αυτής της εξάρτησης πρέπει να αποθηκευτεί στη θερμοκρασία δωματίου ή 2-8℃.

- Ο απομονωτής P1, απομονωτής P2, απομονωτής αντιδραστηρίων φόρτωσης 6×DNA μπορεί να αποθηκευτεί για 12 μήνες υπό τους ξηρούς όρους εάν είναι απαραίτητο για να αποθηκευτούν για έναν πιό μακροχρόνιο χρόνο, τα αντιδραστήρια μπορούν να αποθηκευτούν σε 2-8℃.

Το μέρος ΙΙ αυτής της εξάρτησης πρέπει να αποθηκευτεί σε -20℃.

- PCR EasyTM απομονωτών 2×Leaf αντιδραστηρίων το μίγμα, εάν χρησιμοποιείται συχνά, μπορεί επίσης να αποθηκευτεί σε 4℃ για τη βραχυπρόθεσμη αποθήκευση (χρήση επάνω μέσα σε 10 ημέρες).